Mitä tarkoittaa PCR-nukleiinihappodetektio, menetelmät ja vaiheet
Nukleiinihappotestaus on tällä hetkellä tehokas tapa määrittää, kantaako virus uutta koronavirusta. Tällä hetkellä ihmiset käyttävät viitteenä pääasiassa nenäpuikkoja, kurkkupuikkoja ja vasta-aineseerumia. Mutta viimeisimpien Singaporen pääsyvaatimusten mukaan PCR-nukleiinihappotestaus suoritetaan, joten mitä PCR-nukleiinihappotestaus tarkoittaa?
Mitä tarkoittaa PCR-nukleiinihappodetektio?
PCR tarkoittaa polymeraasiketjureaktiota, jota voidaan käyttää DNA:n monistamiseen niin, että pieni määrä DNA:ta monistetaan siinä määrin, että se voidaan havaita. Joidenkin virusten nukleiinihappo on DNA:ta, ja tätä menetelmää on käytettävä havaitsemiseen. Siksi PCR ei ole suoritettu tarkistus, vaan menetelmä DNA:n havaitsemiseksi. Esimerkiksi hepatiitti B -viruksen DNA:n kvantifiointi käyttää tätä menetelmää. DNA-tarkastuksen tarkoituksena on toisaalta diagnosoida sairaus. Jos jopa taudinaiheuttajan DNA voidaan havaita, se tarkoittaa, että patogeeni on infektoitunut; toisaalta se on arvioida, kuinka paljon virus on replikoitunut, jotta voidaan arvioida taudin vakavuus tai hoidon vaikutus.
PCR-nukleiinihapon havaitsemismenetelmät ja -vaiheet
Nukleiinihappotestaus vaatii viisi vaihetta: näytteenotto, näytteen säilyttäminen, retentio, nukleiinihappojen uutto ja tietokonetestaus.
Ensimmäinen vaihe nukleiinihappojen havaitsemisessa on kerätä ihmisen eritteet ja pyyhkiä nenäontelo tai nielun takaseinä ja molemminpuoliset nielurisat nenätestillä tai nielutestillä.
Toisessa vaiheessa lääkintähenkilöstö säilytti näytteen, upotti koekappaleen pään solunsäilytysliuokseen ja ruuvaa putken korkin kiinni välittömästi hännän murtumisen jälkeen.
Kolmannessa osassa näyte laitetaan ilmatiiviiseen pussiin, säilytetään ja lähetetään tarkastettavaksi ajoissa.
Neljäs vaihe on lähettää näyte laboratorioon nukleiinihapon uuttamiseksi.
Viidennessä vaiheessa uute alistetaan fluoresoivalle PCR-amplifikaatioreaktiolle.
Mikä on nukleiinihappo
Nukleiinihappo (nukleiinihappo) on eräänlainen biologinen makromolekyyli, joka koostuu nukleotideista (nukleotideista), jaettu ribonukleiinihappoon (RNA) ja deoksiribonukleiinihappoon (DNA), jossa RNA on enimmäkseen yksiketjuinen rakenne, DNA on enimmäkseen kaksijuosteinen rakenne. Nukleiinihappo on prionin lisäksi elämälle välttämätön biologinen makromolekyyli. Sen päätehtävä on muodostaa elämän geneettisen tiedon kantaja. Lisäksi joitain nukleiinihappoja voidaan käyttää ja osallistua biologisesti aktiivisten entsyymien muodostukseen. Molekyylit tai muut molekyylikoneet.
Mikä on nukleiinihappotestaus
Nukleiinihappojen havaitseminen on nimensä mukaisesti nukleiinihappojen havaitsemista.
Mitkä ovat nukleiinihappotestauksen ainutlaatuiset edut? Miksi sitä voidaan käyttää"kultastandardin" uuden koronaviruksen diagnosointiin?
Itse asiassa jokaisella tunnistusmenetelmällä on omat sovellusskenaarionsa. Esimerkkinä viruksen havaitsemisesta, tavallisten immunologisten havainnointimenetelmien (kolloidinen kulta, ELISA, kemiluminesenssi jne.) havaintokohteena on viruksen antigeeni tai vasta-aine, joka vastaa"side drawn". Koska tartunnasta havaitsemiseen on aikaikkuna, immunologiset havaitsemismenetelmät eivät yleensä sovellu varhaiseen diagnoosiin.
Mitä tarkoittaa PCR-nukleiinihappodetektio, menetelmät ja vaiheet
Vääriä positiivisia ja vääriä negatiivisia
1. Väärä positiivinen
Vääriä positiivisia tuloksia on yleensä vähemmän. Yleensä laboratoriohenkilöstön virheellinen toiminta voi johtaa näytteiden väliseen ristikontaminaatioon tai monistettujen tuotteiden jäännöskontaminaatioon. Tässä tapauksessa voidaan aiheuttaa vääriä positiivisia tuloksia.
Väärät positiiviset tulokset voidaan kuitenkin kiertää tehokkaasti valvomalla tiukasti havaitsemisprosessia ja toteuttamalla strategia, jossa osallistutaan satunnaisesti useiden negatiivisten näytteiden havaitsemiseen.
2. Väärä negatiivinen
Tässä on selitettävä, että väärät negatiivit PCR:n havaitsemisessa ja kliiniset väärät negatiivit eivät itse asiassa ole sama käsite.
Esimerkiksi Internetissä kiihkeästi keskustelun kohteena olevan uuden koronaviruksen diagnoosin vuoksi kliinisillä väärillä negatiivisilla tuloksilla tarkoitetaan tapauksia, joissa kliinisissä oireissa ja kuvantamistutkimuksissa on vahvasti epäilty tartunnasta, mutta PCR-testi on toistuvasti tai aina negatiivinen; ja PCR-testi väärä negatiivinen viittaa kerättyyn Näytteessä on riittävä määrä uutta koronavirusta, mutta sitä ei ole havaittu.
Väärien negatiivisten tulosten välttämiseksi nukleiinihappotestauksessa tärkeimmät ratkaisutarpeet ovat: (1) tartunnan saaneen henkilön soluissa on riittävästi virusta, (2) viruksen sisältävät solut voidaan kerätä kerättyyn näytteeseen ja (3) ) näytteessä oleva virus havaitaan Nämä kolme linkkiä.
Niistä PCR-sarjojen tekniset parametrit vaikuttavat pääasiassa kolmanteen tunnistuslinkkiin.
Vain kolmannen testilinkin tapauksessa, jos virusten määrä näytteessä on alle tietyn tason (alle vähimmäishavaitsemisrajan), PCR-sarja ei pysty havaitsemaan sitä. Tästä näkökulmasta katsottuna vääriä negatiivisia tuloksia PCR-detektiossa ei voida täysin välttää. Tästä syystä virusspesifisen vasta-ainetestauksen kehittämistä on tarpeen täydentää.
