Tapoja välttää solukontaminaatio: Pipetointivinkkejä, jotka sinun on tiedettävä
Monien soluviljelmässä kontrolloitujen muuttujien joukossa yksi tietty muuttuja vaikuttaa koko kokeeseen: kontaminaatio. Yksi solukontaminaatioon vaikuttava tekijä ei aina ole tutkassa, ja vaikka se voi hiljaa vaikuttaa solujen terveyteen ja vaikuttaa mittaustietoihin, se on pipetointikontaminaatio.
Pipettien, pipetin kärkien ja pipetointiohjelmien valintaan kiinnitetään vähän huomiota kokeita suunniteltaessa. Jopa yleisliuos (autoklavointi) pipetointikontaminaation välttämiseksi ei välttämättä ole niin tehokas kuin yleisesti uskotaan.
Soluviljelyn ensimmäinen sääntö: vältä kontaminaatiota. Miksi steriili tekniikka on niin tärkeä onnistuneelle soluviljelylle?
Aseptinen tekniikka on ainoa tapa saada luotettavia ja toistettavia tuloksia. Saastuminen voi vaikuttaa solujen kasvuun, aineenvaihduntaan ja terveyteen -- jota tutkijat ovat kiinnostuneita tutkimaan. Saastuneilla solulinjoilla ei ole haluttuja ominaisuuksia, ja ne toimivat joka kerta eri tavalla kontaminaation vakavuudesta riippuen. Lisäksi, jos epäpuhtaudet kasvavat liiaksi kiinnostaviin soluihisi, saatat päätyä tutkimaan väärää organismia.
Millaisia saasteita tutkijat usein kohtaavat?
Yleisiä saastumisen lähteitä ovat bakteerit, hiiva ja home. Soluviljelytyössä vaikein havaita ja hävittää mykoplasma on. Vähemmän yleisiä kontaminaatiotyyppejä ovat esimerkiksi laboratoriotarvikkeissa olevat muoviliuotteet.
Mitkä ovat yleisimmät solukontaminaation syyt?
Yleinen kontaminaatiolähde on huono pipetointi, kuten kontaminoituneiden pipettien ja suodattamattomien kärkien käyttö. Lisäksi ongelmana on hyvien laboratoriokäytäntöjen puute, kuten instrumenttien, kuten inkubaattorien tai laminaarivirtauskaappien, riittämätön dekontaminaatio. Mykoplasman poistamiseksi tarvitaan suodatus käyttämällä 0,1 µm suodatinta 0,2 µm suodattimen sijaan.
Kolme pipetointikontaminaatiota:
1. Pipetin kontaminaatio näytteeseen: Pipetti tai pipetin kärki saastuttaa näytteen.
Kuinka välttää:
Käytä steriilejä suodatinkärkiä estääksesi pipetin rungon kontaminoitumisen.
Vaihda pipetin kärki jokaisen näytteen jälkeen.
Autoklaaa tai steriloi pipetit säännöllisesti etanolilla. Valitse autoklaavin kanssa yhteensopiva pipetti.
2. Näytteen välinen kontaminaatio: Näytteen pipetointi pipetin runkoon saastuttaa pipetin.
Kuinka välttää:
Käytä suodatinkärkiä tai syrjäytyskärkiä estääksesi näytteiden pääsyn pipetin runkoon.
Kun pipetoi, pidä pipetti pystyasennossa. Säilytä pipetti pystyasennossa.
Kallista pulloa pipetoinnin aikana.
Vapauta painike hitaasti, jotta näyte ei roiskuisi pipettiin. Valitse pipetti, jossa on pehmeä poistotoiminto.
3. Näytteiden välinen kontaminaatio: Jäännöspipetointinäytteet siirretään seuraavaan näytteeseen. Yleensä tapahtuu, kun samaa kärkeä käytetään useita kertoja.
Kuinka välttää:
Vaihda pipetin kärki jokaisen näytteen jälkeen.
Käytä suodatinkärkiä tai syrjäytyskärkiä estääksesi näytettä pääsemästä pipetin runkoon ja siirtymästä seuraavaan näytteeseen.
Varmista, että pipetin kärki on tiivistetty pipetin päällä näytteen vuotamisen välttämiseksi. Esimerkiksi Yongyue Medicalin kärki.
Onko olemassa kontaminaatiotekijöitä, joista tiedemiehet eivät ehkä ole edes tietoisia?
Autoklaavin tehokkuutta ei useinkaan todeta, ja jos autoklaavi ei toimi kunnolla, autoklaavissa olevat pipetin kärjet eivät välttämättä ole steriilejä. Suojapakkaukseen käärityt esisteriloidut suodattimet ovat turvallisin vaihtoehto tällaisten onnettomuuksien estämiseksi. Korkealaatuisten pipetin kärkien esisterilointiprosessi validoidaan säännöllisesti esisteriloinnin tehokkuuden varmistamiseksi.
Kuinka pipetointi- ja annosteluvälineet helpottavat tutkijoiden kykyä käsitellä näytteitä steriilissä ympäristössä?
Oikeiden pipettien ja pipettien kärkien valitseminen voi helpottaa aseptista työnkulkua. Yongyue lääketieteelliset pipetit on helppo puhdistaa ja avata ilman työkaluja, mikä nopeuttaa päivittäistä puhdistusta. Koska autoklavointi poistaa lian tehokkaammin kuin etanolipyyhkeet, Sartoriuksen mekaaniset pipetit ovat täysin autoklavoitavissa, mikä tarkoittaa, että voit dekontaminoida pipettisi luotettavasti. Pehmeä kärjen irrotus estää mahdollisen kontaminaatioriskin roiskeilta, kun kärkeä työnnetään ulos. Esisteriloidut suodatinkärjet suojaavat näytteitäsi ristikontaminaatiolta. Yongyue lääkinnälliset kärjet on myös pakattu vuotamattomiin pakkauksiin, mikä tarkoittaa, että mahdollinen kontaminaatio säilytys- ja toimitusolosuhteissa ei pääse kosketuksiin kärkien tai kärkilaatikon kanssa.
Kuinka tiedemiehet voivat välttää saastumisen? Mitkä ovat parhaat vinkkisi steriiliin työhön?
Ensinnäkin hyvä laboratoriokäytäntö ja työvaiheiden huolellinen suunnittelu. Varmista, että säilytät laminaarivirtauskaapissa vain sitä, mitä tarvitaan tiettyä työnkulkua varten, ja käytä yhtä soluviljelmää samanaikaisesti. Lisäksi säännöllinen kontaminanttien, kuten mykoplasman, testaus antaa sinulle mielenrauhaa ja luottamusta tuloksiisi. Kun työskentelet steriileissä olosuhteissa, esisteriloituihin suodatinkärkiin ja steriileihin reagensseihin käytetty raha on rahan arvoinen.
