Solun muotoiluun kuuluu vaiheet solujen injektiosta, muotoilusta ja hankkimisesta. Soluviljelypullossa olevien solujen täytyy kasvaa ja kehittyä tietyssä määrin. Tällä hetkellä on välttämätöntä luottaa trypsiiniin sulattamaan pullon ulkoseinämän solut ja sitten tuntemaan sen. Entsyymien tapauksessa ruoansulatusaikaa on valvottava.
T75 soluviljelypullo
Trypsiini kuuluu eri trypsiiniluokkaan, joka voi hajottaa proteiineja solukalvoilla, jotka on fuusioitu soluviljelypulloihin. Liuottamalla proteiinia vastaavasta osasta proteiinien liitoskohdassa oleva proteiini liukenee ja solu muuttuu pallomaiseksi oman sisäisen rakenteensa solurungon tukivoiman vaikutuksesta erottaen siten solut. Trypsiinin hajoamisen taso on avaintekijä solujen muovaamisessa: liiallinen pilkkominen lisää solujäänteitä, mustat roskat lisääntyvät, solut putoavat kokonaisuutena vaarantaen vakavasti solujen elinkelpoisuuden, ja jotkut solut kelluvat poisheitetyn trypsiinin ulosvirtauksen mukana; jos ruoansulatus ei ole riittävä, on solujen vaikea puhaltaa alas pullon sisäseinästä ja jatkuva puhallus ja lyöminen vahingoittavat myös solujen toimintaa.
soluviljelypullo
Seerumiproteiiniviljelyliuospullo
Eri laitoksissa tai soluissa haiman entsyymien vaikutus ei ole sama. Haimaentsyymin dispergoituneiden solujen aktiivisuus liittyy myös sen pitoisuusarvoon, lämpötilaan ja vaikutuksen kestoon. Kun pH on 8.{1}} ja lämpötila on 37, haimaentsyymin vesiliuoksen tehokkuustaso on suhteellisen vahva. Trypsiiniä käytettäessä pitoisuutta, lämpötilaa ja kestoa tulee valvoa hyvin, jotta estetään liiallisen ruoansulatuksen aiheuttamat soluvauriot. Koska Ca2, Mg2 ja seerumiproteiini, proteiinigrammat vähentävät pankreatiinin aktiivisuutta, joten valmistettaessa pankreatiinin vesiliuosta, käytä BSS:ää ilman Ca2:ta, Mg2:ta, kuten: D-Hanks-liuosta. Ruoansulatusta lopetettaessa trypsiini voidaan pysäyttää seerumiproteiinisoluviljelyväliaineella tai trypsiinihidastimella trypsiinin soluvaikutuksen pysäyttämiseksi.
viljelypullo
T25-soluviljelypullo
Lisäksi, jos kyseessä on äskettäin ostettu solu, voit käyttää pienempää trypsiinipitoisuutta tutkiaksesi ensin ruoansulatusaikaa ja tarkkaillaksesi, muuttuvatko solut pyöreiksi minuutin välein ja tehdäksesi hyvän ennätyksen. Kaiken kaikkiaan otettaessa soluja soluviljelypulloon, on välttämätöntä kontrolloida trypsinisaatioaikaa, jotta solujen elinkyky säilyy tehokkaasti.
